ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Является результатом выполнения НИР.

Среди достаточно большого числа неспецифических стимуляторов иммунитета, различающихся по происхождению, структуре и механизму действия, лишь немногие получили признание и широкое применение в ветеринарии и медицине.

В большинстве случаев это связано с токсичностью препаратов, наличием побочных явлений, а также с недостаточностью и непостоянством стимулирующего эффекта (Масычева В.И. с соавт., 1997). В этой связи разработка новых иммуностимуляторов по прежнему представляет актуальную задачу прикладной иммунологии и биохимии. Известны средства для повышения резистентности организма животных, представляющие биологически активные препараты, содержащие ткани разных органов.

В основу получения иммунотропного препарата положен известный метод Филатова П.Ф., включающий процесс замораживания, размораживания и гомогенизацию тканей паренхиматозных органов.

Оптимизируя данный метод, провели не настаивание гомогената, а его гидролиз с использованием янтарной кислоты.

Янтарная кислота - универсальный биогенный стимулятор обмена веществ живой клетки, естественный эндогенный субстрат окислительно-восстановительных процессов в живых организмах. Избирательность действия экзогенной янтарной кислоты заключается в том, что она «плохо» проникает в нормальные ткани, значительно легче в клетки и ткани, находящиеся в состоянии возбуждения или патологически измененные. В этой связи применение янтарной кислоты показано для повышения устойчивости к неблагоприятным воздействиям внешней среды, в частности при стрессовых ситуациях, интенсивных физиологических нагрузках, всевозможных нарушениях обмена веществ и интоксикациях, для повышения работоспособности и т.д. Таким образом, янтарная кислота наиболее эффективна в использовании для проведения кислотного гидролиза.

Наиболее оптимальная концентрация янтарной кислоты в растворе должна находиться в пределахpH=3,5-4,0.

Отработанная технология проведения гидролиза паренхимы селезенки с использованием янтарной кислоты позволяет не только перевести значительную часть биомассы гомогената во взвешенную молекулярную взвесь, но и решить одновременно проблему получения очищенного от балластных веществ продукта. Однако полученный по такой технологии продукт содержал повышенную кислотность, что не позволило бы применять его для парентерального введения.

Решение проблемы инактивации повышенной кислотности было найдено за счет добавления раствора едкого натрия. Янтарная кислота, вступая в реакцию с едким натрием, переходит в соль янтарной кислоты - сукцинат натрия. Выпадение осадка при этом не наблюдалось. Автоклавирование препарата проводили при температуре 100 ⁰С в течение 5 мин.

Как показали бактериологические исследования, высевы содержимого флаконов на МПА, МПБ под вазелиновое масло, не вызывали пророста микрофлоры, что свидетельствовало о стерильности препарата. Безвредность и токсичность экспериментальных серий препарата проверяли путем внутрибрюшинного введения белым мышам в дозе 0,5 и 1,0 мл. При этом клинически видимых расстройств или гибели мышей не отмечали (срок наблюдения 10 дней).

Для получения первичной информации о иммуномодулирующих свойствах препарата избрали модель, основанную на определении выживаемости белых мышей при заражении их заведомо смертельной дозой культурыE.coli. Полученный янтарный спленолизат обладал выраженным иммуностимулирующим действием и способностью повышать устойчивость организма животных к эшерихиозной инфекции. Основываясь на уникальных свойствах формалина не только обезвреживать микроорганизмы, но и инактивировать их в анатоксические, с осхранением иммуногенных свойств, логично предположить, что добавление формалина к янтарному спленолизату смогло бы значительно повысить его антимикробное действие. Нахождение формалина в препарате было бы полезно для снятия состояния повышенной аллергизации и токсикоза организма продуктами жизнедеятельности микроорганизмов.

Добавление формалина к янтарному спленолизату диктуется еще необходимостью обеспечения надежной полноты стерилизации препарата.

Проведение экспериментальных опытов показало сохранность и целостность препарата во время стерилизации автоклавированием.