ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результат выполнения технологической разработки.

Олаквиндокса тритурат - новый химиотерапевтический препарат из группы хиноксалинов. Это гомогенная смесь углекислого кальция и двуокиси кремния с определенным количеством активного вещества и с добавлением жидкого парафина (табл.1). Активным веществом препарата являетсяn- (2-гидроксиэтил) амид 3-метилхиноксалин-1,4-диоксид-2-карбоновой кислоты. Эмпирическая формула: С ₁₂Н ₁₃n₃О ₄. Относительная молекулярная масса: 263,3.

Таблица 1

Состав олаквиндокса тритурата

Олаквиндокса тритурат представляет собой порошок от желтого до коричнево-желтого цвета, без запаха, на вкус горький, нерастворимый в воде (в воде растворяется только активное вещество).

Активное вещество содержит минимум 95% олаквиндокса, и максимум 5% метилового эфира олаквиндокса. Содержание хлоридов д.б. менее 200 ппм, содержание тяжелых металлов не должно превышать 10 ппм. Сульфатная зола: максимум 0,1%. Потеря при сушке: максимум 0,5%. Точка плавления наступает при 210 ⁰С с разложением. Он с трудом растворяется в воде, умеренно в ледяной уксусной кислоте и хорошо растворим в диметилсульфоксиде.

Препарат получают повторной этерификацией этилового эфира кислоты 3-метил-хиноксалин-1,4-диоксид-2-карбоновой с этаноламином или конденсациейn-(2-гидроксиэтил) амида ацетоуксусной кислоты с бензофуразан-1-оксидом. Получаемое вещество смешивается с углекислым кальцием и окисью кремния в присутствии жидкого парафина, образуя препарат олаквидокса тритурат. Смесь гомогенизируется.

Препарат должен удовлетворять следующим требованиям (табл. 2).

Таблица 2

Физико-химические свойства олаквиндокса

Сущность идентификации: тонкослойная хроматография на силигале по Кнапштейну (1975) на пластинахtvСилуфол УФ 366. Внесение растворов- от 5 до 10 гамма олаквиндокса в водном растворе.

Система проявления: эфир уксусной кислоты 20 мл, этанол 4,5 мл, 25% раствор аммиака в воде 0,5 мл. Проявление: в УФ лучах при 366 нм. При соблюдении этих условий проявляется пятноrfоколо 0,5.

Содержание активного вещества определяется спектрофотометрическим методом: по способу Кнапштейна. Для этого необходимы спектрофотометр для измерения в УФ-области с оснащением сn-(2-гидроксиэтил) амид 3-метилхиноксалин-1,4-диоксид-2-карбоновой кислоты и стандартной пробой с известным содержанием активного вещества.

Исследование проводится в темном помещении при красном свете в двух повторностях. В мерную колбу емкостью 500 мл отвешивают 0,100 г стандартной пробыn-(2-гидроксиэтил) амид 3-метилхиноксалин-1,4-диоксид-2-карбоновой кислоты, растворяют в воде, при 20 ⁰С дополняют водой до метки и тщательно перемешивают. Пипеткой 5 мл этого раствора переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, дополняют водой до метки, тщательно перемешивают и определяют спектральную поглотительную способность на спектрофотометре в кварцевой кювете толщиной 1 см при 371 нм по сравнению с водой.

В мерную колбу емкостью 500 мл отвешивают 1 г пробы и прибавляют 300 мл воды. После 20-минутного перемешивания доводят водой до метки, тщательно перемешивают, а раствор фильтруют через бумажный фильтр в стакан емкостью 400 мл. После удаления примерно 25 мл фильтрата из следующего фильтрата пипеткой переносят 5 мл в мерную колбу емкостью 100 мл, дополняют водой до метки и тщательно перемешивают. Оптическая плотность измеряется на спектрофотометре при соблюдении вышеприведенных условий.

Содержание активного вещества в % (x) определяют при помощи следующей формулы:

где:

а - масса навески пробы в г;

b- масса навески стандартной пробы активного вещества в г;

А - оптическая плотность раствора пробы;

В - оптическая плотность раствора стандартной пробы активного вещества.

После пересчета содержания в 1 кг олаквиндокса тритурата должно быть обнаружено 100-110 г активного вещества.

Содержание метилового эфира 3-метилхиноксалин-1,4-диоксид-2-карбоновой кислоты (побочного вещества) в олаквиндоксе тритурате определяется методом тонкослойной хроматографии на силикагеле. Для этого 2,5 г пробы перемешивают в течение 10 мин с 50 мл раствора этанола в воде (1:1) и фильтруют. Фильтрат используется для испытания.

Сравнительный раствор этого соединения готовят следующим образом. 0,025 г его стандартной пробы растворяют в 100 мл этанола на тонкослойную пластинку силуфол УФ 254 или 254\366 переносят по 5 мл растворов и проявляют в системе ацетон-хлороформ 130:70. При соблюдении этих условийr _fолаквиндокса составляет примерно 0,17, аr _fметилового эфира лимонной кислоты примерно 0,67. Выявление производят в УФ свете 254 нм, 366 нм.

Величина и интенсивность пятна метилового эфира 3-метил-хиноксалин-1,4-диоксид-2-карбоновой кислоты у раствора пробы не должна быть больше пятна сравнительного раствора. Растворы стандартных веществ следует готовить свежими; растворение, перенос и проявление следует производить в темноте и быстро.

Содержание вещества в препарате не должно превышать 0,5%.

При определении АДВ в кормовых смесях олаквиндокс экстрагируется из корма смесью ацетона с водой (9:1). Из сырого экстракта упаривают ацетон, водный остаток чистят путем встряхивания с петролейным эфиром, после чего следует сепарация олаквиндокса на тонком слое силикагеля. Идентификация пятна олаквиндокса осуществляется в УФ свете; пятно переносят с силикагелем в колбу, экстрагируют водой и регистрируют спектр водного раствора в области 300-450 нм.

Для этого необходимы спектрофотометр, вращающийся вакуумный испаритель, центрифуга, аппарат для встряхивания, микродозатор МД 100 и камера для проявления. Химические реактивы, растворы: ацетон ч.д.а., петролейный эфир ч.д.а., этилацетат ч.д.а., этанол денатурированный бензином, этиламин ч.д.а., олаквиндокс- стандартная субстанция,dc- готовые пластинки Киселгеля 60f-254, 026 нм, 20x20 см (Мерк), основной- 100 мг олаквиндокса в 100 мл воды, стандартный раствор олаквиндокса, рабочий- 10 мл основного раствора дополняют до 100 мл мерной колбы водой. Система проявления: этилацетат, ацетон, этанол, диэтиламин (50:40:10:5).

Ход исследования. Отвешивают 20 г испытуемой пробы корма, количественно переносят в колбу емкостью 500 мл, прибавляют 200 мл экстракционной смеси, закупоривают и подвергают механическому встряхиванию в течение 2 часов. Затем следует фильтрация через складчатый фильтр; первая часть (10 мл) не используется. 100 мл фильтрата переносят в колбу с круглым дном и сгущают на вращательном вакуум-испарителе. Остаток в колбе (6-9 мл) не должен обладать запахом ацетона. В колбу прибавляют 50 мл петролейного эфира, встряхивают, а после разделения фаз осторожно удаляют слой петролейного эфира. Эта операция повторяется еще дважды, всякий раз с 50 мл петролейного эфира. Остаток петролейного эфира удаляется на вращающемся вакуум-испарителе, а остаток из колбы количественно переносят в мерную колбу емкостью 10 мл. Колбу прополаскивают небольшим количеством воды. Промывная вода переносится к главной части и ее дополняют до метки. Этот раствор служит в качестве испытуемого раствора, который перед переносом центрифугируют в течение 10 мин. при 10000 об\мин.

Тонкослойная хроматография. На хроматографическую пластинку предписанного качества переносят 0,2 мл рабочего раствора олаквиндокса в форме линии длиной 2 см, а возле нее 0,2 или 0,4 мл пробы.

Проявление осуществляется в хорошо насыщенной и выложенной бумагой камере на расстоянии 1 см от верхнего края. Затем хроматограмму вынимают и удаляют растворитель в струе холодного воздуха. Положение олаквиндокса идентифицируется под УФ светом (254 нм). Обозначенную зону стандарта количественно переносят в сосуд для центрифугирования, прибавляют 2,0 мл воды и на протяжении 30 минут встряхивают. Затем центрифугируют в течение 5 минут при 10000 оборотах в минуту. Равным образом обрабатывают пятна проб.

Прозрачную надосадочную жидкость переносят в 1 см кварцевую кювету и регистрируют спектр на регистрационном спектрофотометре в пределах от 300 до 450 нм по сравнению с водой. Для расчета используется величина максимума при 373 нм и слепая величина при 415 нм.

Расчет: рр олаквиндокс

где:

n _st- навеска стандартной субстанции олаквиндокса в мг;

n _vz- навеска пробы в г ;

a _st- оптическая поглотительная способность стандарта олаквиндокса (после отсчета слепой величины при 415 нм);

a _vz- оптическая поглотительная способность пробы (после отсчета слепой величины при 415 нм);

v _st-количество переносимого стандарта в мл ;

v _vz- количество переносимой пробы в мл.