ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результаты проведения научно-исследовательской работы.

Результативность традиционной селекции свиней повоспроизводительным качествам крайне низкая. Так, если в стаде, где среднеемногоплодие составляет 9 поросят, для ремонта отбирать свинок от маток смногоплодием 10 поросят, то для поднятия многоплодия на одного поросенкапотребуется 10 поколений.Всвязи с этим очень актуальна разработка методов прямой оценки генотипа. Один из таких методов - полимеразнаяцепная реакция (ПЦР). Метод ПЦР дает возможность определить какой именно аллельный вариант того или иного гена несет данный организм и, следовательно, отбирать животных не только по фенотипу, но и по генотипу.

Так, например, удалось установить, что многоплодие у свиней связно стем, какую длину имеет ген рецептора эстрогена (ESR-ген). Животные, несущие удлиненный вариант этого гена, достоверно производят гнезда большего размера. Также было установлено, что на воспроизводительные качества свиней влияют некоторые вредные мутации. Мутация в гене рецептора рианодина скелетных мышц (RYR1-ген) в гомозиготном состоянии приводит кбиохимическим нарушениям и развитию стрессчувствительности (илизлокачественной гипертермии) у свиней. Помимо снижения плодовитостистрессчувствительные животные имеют мясо худшего качества (PSL-свинина), они плохо переносят изменения условий окружающей среды.

Цельданной работы - предложить генно-технологические тесты,адаптированные к требованиям массового тестирования животных,позволяющие отобрать свиней стрессустойчивых, с генетическиобусловленным повышенным многоплодием.

Обследовали свиней породы ландрас в ЗАО "Индустриальный» Краснодарского края. Пробы ткани отобрали у 73 свиней (хряков и маток).Ядерную ДНК выделяли из кусочка уха свиней объемом около 0,1 см,используя наборы для выделения фирмы «Силекс»,г.Москва. Методом ПЦРпроводили амплификацию участка генаRYR1 длиной 134 пн между позициями 1795 и 1928, где расположена точковаямутациявпозиции1843,являющаясяпричиной синдрома злокачественной гипертермии. Полученные амплификатыподвергали рестрикционному анализу.Послерестрикции амплификатов наблюдали следующую картину расщепления - две полосы длиною 50 и 84 пн у гомозиготных стрессустойчивых животных, 3 полосы (134 пн, 50 пн, 84 пн) угетерозигот и 1 полосу (134 пн) у стрессчувствительных.

Также проводили методом ПЦР амплификацию участка гена рецептораэстрогена. Путем гидролиза амплификата рестриктазойPvu11определяликаной именно аллельный вариант генаESR(4.3 или 3.7) несет каждое из тестируемых животных.

Среди проанализированных хряков и маток 65,8% оказались стрессустойчивыми, 34,2% были гетерозиготны и несли в своем генотипе мутантный аллель. Гомозиготных стрессчувствительных животных в исследуемой группе обнаружено не было. Было установлено, что стрессустойчивые матки превосходят гетерозиготных по многоплодию на 0,9 поросенка.

Среди протестированных свиней 78,4% несли генотипESR4.3\4.3, 20,3% были гетерозиготны (генотипЕSR4.3\3.7), а 1,3 % оказались гомозиготны по аллелю 3.7. При сопоставлении данных по 70 опоросамустановлена тенденция к повышению многоплодия у группы с генотипом4.3\4.3 по сравнению с группой 4.3\3,7 на 0,3 поросенка.

Проведенные исследования показали, что совместное использование двух маркеров в оценке воспроизводительных качеств свиней представляется наиболее эффективным для селекции. Так, при подборе родителей с отсутствием в генотипе мутации в гене рецептора рианодина и несущих аллельный вариант гена рецептора эстрогена 4.3 в гомозиготном состоянии многоплодие увеличивается на 3,5 поросенка (11,8 против 8,3; Р<0,01) по сравнению с родителями, гетерозисными по стрессу. Кроме того, в группе с высоким многоплодием наблюдалась лучшая сохранность гнезда.

Таким образом, метод ПЦР позволяет более быстро и эффективно решать конкретные селекционные задачи, тем самым значительно экономя время и материальные ресурсы.

Методом ДНК-диагностики в популяции свиней породы ландрас отобраны производители, значительно превосходящие остальных животных по воспроизводительным качествам.