ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результат выполнения научно-исследовательской работы.

Метод относится к области ветеринарной диагностики и может быть использован для зкспресс-определения каталазной и/или пероксидазной активности кала как маркера кровоточивости язвы желудка.

Существующими методами анализа практически невозможно определить микроколичества крови в той стадии заболевания, когда кровоточивость из зоны язвы является слабой и периодической. Своевременное определение этого во многом поможет

правильному и своевременному назначению лечения, предотвращению усиления кровотечения и прободений язвы.

Так как фермент каталаза локализуется в печени и эритроцитах и не разрушается при гемолизе эритроцитов, то, следовательно, даже при минимальной кровоточиво­сти активность каталазы в каловых массах повышается. Это может быть объяснено разруше­нием эритроцитов, излившихся при кровотечении и поступлением эритроцитарной каталазы в сосудистое русло. Это свойство каталазы может быть использовано в качестве скрининг-тестов на предмет наличия кровоточивости язвы.

При этом каталазная активность кала определяется следующим образом: порцию утрен­него кала разбавляют 1:10 водой, центрифугируют 30 мин при 3000 об/мин и определяют каталазу в надосадочной жидкости. Для этого к 0,1 мл надосадочной жидкости прибавляют 1 мл 1%-го водного раствора йодида калия, 1 мл 1%-го водного раствора уксусно-кислого натрия и 1 мл 0,03% водного раствора перекиси водорода.

Стандартный 0,01 н раствор йода служит для приготовления калибровочной серии. Для этого 0,42 мл его помещают в мерную колбу на 100 мл и доводят водой до метки. Из этого раствора готовят калибровочную серию

Затем во все пробирки шкалы и в пробу добавляют по 0,5 мл 0,02%-го раствора диметилпарафенилендиамина в 0,1 н растворе соляной кислоты и через 10 мин. колориметрируют на ФЭК в кювете 10 мм, со светофильтром 490 нм.

Данным методом может быть определена концентрация каталазы и/или пероксидазы от 1,0 нг/мл и выше, т.е. как раз в том промежутке концентраций , в котором она находится в самом начале стадии кровоточивости язвы желудка.