ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результат выполнения технологической разработки

Принцип способа основан на методе разведения при тестировании возбудителей инфекционных заболеваний с помощью двух концентраций антибиотика в соответствии с его накоплением в тех или иных органах при применении максимальных и средних терапевтических доз.

Способ осуществляется следующим образом.

Тестирование микроорганизмов проводится в полистироловом планшете по ТУ-64-2-375-86 с горизонтальными и вертикальными рядами ячеек (8х12). В три ячейки планшета помещается смесь микроорганизмов, полученных от больных пациентов. В качестве инокулята используют взвесь свежевыращенной в соответствии с утвержденными рекомендациями культуры. Культуру, выращенную на поверхности плотной питательной среды, суспендируют и разводят 0,9% раствором хлористого натрия или питательного бульона до 10 ЕД по отраслевому стандартному образцу для визуального определения мутности бактерийных взвесей, а затем взвесь разводят еще в 10000 раз. Полученный инокулят, содержащий приблизительно 10 ⁵ микробных клеток в 1 мл. взвеси, с помощью стерильной пипетки по ГОСТ 20292-74Е или пипеточного дозатора «labsystem» вносят по 0,1 мл. в планшет в три свободные ячейки. Для контроля стерильности в четвертую ячейку вносят 0,2 мл. питательного бульона. Далее в первую ячейку вносится раствор исследуемого антибактериального средства в объеме 0,1 мл. таким образом, чтобы в полученном объеме содержалось то количество препарата, которое накапливается в пораженном органе больного при введении средней терапевтической дозы.

Во вторую ячейку помещают также 0,1 мм раствора антибиотика, по уже в концентрации, накапливаемой в ткани при введении высшей терапевтической дозы (в 3-6 раз больше). Планшет закрывают крышкой и инкубируют при температуре 36±1 ⁰С в течение 18-24 ч.

Периодически, с интервалами в 2-3 часа оценивают прозрачность содержимого ячеек. Учет результатов проводят визуально после инкубации по появлению видимого роста (помутнению питательной среды) в ячейке контроля роста. Необходимое время инкубации микросистемы зависит от скорости роста исследуемого микроорганизма и находится в пределах 6-20 часов.

Результаты оцениваются следующим образом:

-возможная клиническая эффективность антибактериального препарата расценивается как «высокая», если отсутствует рост (прозрачная среда) в ячейках с большой и малой концентрации препарата;

-возможная клиническая активность антибактериального препарата расценивается как «неэффективная», если наблюдается рост (помутнение) среды в обеих ячейках;

-возможная клиническая эффективность препарата расценивается как «вероятная» при использовании терапевтической дозы, если отсутствует рост (прозрачная среда) лишь в ячейке с большой концентрацией, а в ячейке с малой;

-наблюдается рост микроорганизмов (помутнение среды).

В таблицах 1-4 представлены наборы препаратов, с помощью которых предлагается тестирование возбудителей инфекционных заболеваний человека (см. таблицы 1, 2, 3, 4).