ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результат выполнения научно-исследовательской работы.

На кафедре медицинской химии Кировского государственного медицинского института модифицирован и внедрен хемилюминесцентный метод контроля за интенсивностью реакций перекисного окисления липидов и определения продуктов ПОЛ в биологических жидкостях.

Принцип метода

Метод индуцирования хемилюминесценции перекисью водорода с сульфатом железа основан на том, что в данной системе происходит каталитическое разложение гидроперекиси ионом металла с переходной валентностью. При этом развивается цепная реакция, один из продуктов которой гидропероксидный радикал вступает в реакцию рекомбинации с образованием неустойчивого пероксида, который разлагается с выделением кванта света (хемилюминесценция), что и регистрируется прибором - хемилюминометром.

Приборы: люминометр, центрифуга.

Исследуемый биологический материал: биопсийные ткани, сыворотка или плазма крови, амниотическая жидкость, спинно-мозговая жидкость.

Реактивы:

1. Фосфатный буфер, рН 7,4.

2.Сульфат железа (растворяют 28 мг в 100 мл дистиллированной воды).

3. Перекись водорода, 3%-й раствор.

Ход определения

В измерительную ячейку люминометра вносят 0,2 мл фосфатного буфера, 0,4 мл раствора сульфата железа, 0,1 мл биологической жидкости и 0,2 мл перекиси водорода. Возникает вспышка свечения, интенсивность которой служит мерой оценки уровня ПОЛ в исследуемом образце. Хемилюминесценцию регистрируют в течение 60 с с интервалом в 10 с. Метод позволяет определять кинетику процесса в течение 1 мин. Расчет аналитических результатов проводят после построения калибровочной кривой.

Результаты можно выразить в виде графика, где по оси абсцисс откладывают время в секундах, а по оси ординат - скорость реакции (фотон/сек). Определяемая светосумма за 30 с (количество фотонов) и максимальная светоинтенсивность зависят от содержания продуктов ПОЛ в исследуемом образце.

Изменение процессов перекисного окисления липидов наблюдается при заболеваниях печени, почек, легких, сахарном диабете. Метод позволяет улучшить диагностику возможных заболеваний у животных, что в конечном итоге имеет значение для сохранения здоровья и поголовья высокопродуктивного стада.