ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

ПОДРОБНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Заявку на получение дополнительной информации по этому проекту можно заполнить здесь.

Номер

24-197-01

Наименование проекта

Метод обнаружения антигена вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней

Назначение

Сохранение здорового высокопродуктивного свинопоголовья.

Рекомендуемая область применения

Для диагностики и купирования инфекции репродуктивно-респираторного синдрома свиней.

Описание

Результат выполнения научно-исследовательской работы.

В связи с возникновением новой инфекционной болезни репродуктивно-респи-раторного синдрома свиней (РРСС) возникла необходимость в создании отечественных средств диагностики этого заболевания.

При разработке реакции непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ), мы иссле-довали пригодность полученного ФИТЦ-конъюгата для обнаружения вируса репро-дуктивно-респираторного синдрома свиней (РРСС) в зараженных культурах клеток. С целью определения чувствительности и специфичности РНИФ для выявления антигена вируса РРСС использовали культуральные жидкости зараженных культур клеток, со-держащие: вирусы РРСС; классической чумы свиней (КЧС); болезни Ауески; респира-торного коронавируса свиней; болезни Тешена; парвовируса свиней и вирус трансмис-сионного гастроэнтерита свиней (ТГС).

Для этого культуры клеток МАrc-145 и альвеолярных макрофагов свиней (АМС) заражали вышеперечисленными вирусами. Пластины инкубировали в СО 2 инкубаторе в течение 2 - 3 сут. Монослой клеток фиксировали 80%-м охлажденным ацетоном в тече-ние 10 мин. В лунках пластины инкубировали специфическую к вирусу РРСС сыворотку при 37 оС в течение 30 - 45 мин. После отмывки наносили ФИТЦ-конъюгат в рабочем разведении при 37 оС в течение 30 - 45 мин. После отмывки несвязавшегося конъюгата, проводили учет результатов под инвертированным флюоресцентным микроскопом. О специфической реакции свидетельствует наличие характерной флюоресценции в мес-тах локализации вирусных белков в цитоплазме пораженных клеток. В неинфицирован-ных клетках подобной флюоресценции не обнаруживали.

Результаты исследования чувствительности и специфичности РНИФ для выявления антигена вируса РРСС представлены в таблице.

Результаты определения специфичности РНИФ

для выявления антигена вируса РРСС (n=3)

Исследуемые вирусы

Титр вируса

(lg ЦПД 50/мл) в культуре клеток МАrc-145

Титр вируса (lg ЦПД 50/мл)

в культуре АМС

Вирус РРСС шт "s86"

3,0 - 4,0

5,0 - 6,0

Вирус РРСС шт "Мадрид"

1,0 - 2,0

3,0 - 4,0

Вирус КЧС шт "Ши-Мынь"

0

0

Вирус болезни Ауески шт "Бук-Тк-900"

0

0

Вирус болезни Тешена шт "Закарпатский"

0

0

Вирус болезни Тешена сш "С-1"

0

0

Вирус ТГС шт "lindholm""

0

0

Респираторный коронавирус свиней шт "Лук"

0

0

Культуральная жидкость

незараженной культуры

клеток

0

0

Результаты определения чувствительности и специфичности РНИФ свиде-тельствуют, что метод специфичен и чувствителен, позволяет обнаруживать в цито-плазме зараженных клеток антигены вируса РРСС и дифференцировать их от анти-генов гетерологичных возбудителей болезней свиней. Метод позволяет выявлять анти-гены вирулентного вируса РРСС шт "s86" в культуре МАrc-145 (АМ) павших или вынужденно убитых свиней.

Преимущества перед известными аналогами

Метод специфичен, обладает высокой чувствительностью.

Стадия освоения

Способ (метод) проверен в лабораторных условиях

Результаты испытаний

Технология обеспечивает получение стабильных результатов

Технико-экономический эффект

Снижение трудоемкости в 2 раза, увеличение сохранности животных на 50%.

Возможность передачи за рубеж

Возможна передача за рубеж

Дата поступления материала

25.09.2001

Инновации и люди

У павильонов Уральской выставки «ИННОВАЦИИ 2010» (г. Екатеринбург, 2010 г.)

Мероприятия на выставке "Инновации и инвестиции - 2008" (Югра, 2008 г.)

Открытие выставки "Малый бизнес. Инновации. Инвестиции" (г. Магнитогорск, 2007 г.)

Демонстрация разработок на выставке "Малый бизнес. Инновации. Инвестиции" (г. Магнитогорск, 2007 г.)