ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результат выполнения научно-исследовательской работы.

Для диагностики новой эмерджентной инфекции репродуктивно-респираторного синдрома свиней (РРСС) нами успешно применяется метод реакции непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ). С целью исключения возможных перекрестных реакций с другими возбудителями болезни свиней, а также проверки специфичности нашего метода нами был проведен ряд опытов с полевыми и гетерологичными сыворотками крови свиней.

Постановку РНИФ осуществляли в соответствии с методическими указаниями. Культуру клеток МАrС-145 заражали вирусом РРСС шт. "s86". Пластины инкубировали в СО ₂ инкубаторе в течение 2-3 сут. Монослой клеток фиксировали 80%-м охлаж-денным ацетоном в течение 10 мин. В лунках пластины инкубировали специфическую к вирусу РРСС и гетерологичные ему сыворотки при 37 ^оС в течение 30-45 мин. После отмывки наносили ФИТЦ-конъюгат в рабочем разведении при 37 ^оС в течение 30-45 мин. После отмывки несвязавшегося конъюгата проводили учет результатов под инверти-рованным флюоресцентным микроскопом. О специфической реакции свидетельствует наличие характерной флюоресценции в местах локализации вирусных белков в цито-плазме пораженных клеток. В неинфицированных клетках подобной флюоресценции не обнаружили.

Результаты определения чувствительности и специфичности РНИФ для обнару-жения антител к вирусу РРСС представлены в таблице.

Результаты определения чувствительности и специфичности РНИФ

для обнаружения антител к вирусу РРСС

на культуре клеток МАrС-145 (n=5)

Данные, представленные в таблице, свидетельствуют, что разработанный вари-ант РНИФ специфичен и чувствителен, позволяет выявлять антитела к вирусу РРСС в сыворотках крови свиней.

Метод позволяет дифференцировать антитела к вирусу РРСС от антител гетеро-логичных болезней свиней.