ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результат выполнения научно-исследовательской работы.

Разработан простой турбидиметрический метод измерения уровня фибронек-тина с помощью выделенного из донорскойплазмы высокоочищенного фибронектина и антител к нему, полученных путем иммунизацииживотных.

Сущность описываемого метода заключается в образовании комплексов фиб-ронектина с антителами к нему, что дает помутнение смешиваемыхжидкостей. Интен-сивность помутнения пропорциональна концентрациифибронектина в пробе, поскольку антитела берутся в избытке.

Определениефибронектина в образцах плазмыкрови.Дляпроведения анали-за используют плазму крови животных, взятую с применением 3,8%растворацитратанатрия. Допустимо применятьлюбой антикоагулянт, кроме гепарина. В случаеиспользованиясыворотки получают более низкие величины вследствие связывания фибро-нектина с фибрином. 20 мкл исследуемой плазмы тщательно перемешивают в кювете с 1 мл фосфатного буфера и измеряют оптическую плотность раствора(Е1). Затем добавляют в кювету 100 мкл раствора антител, перемешивают содержимое и инкуби-руют в течение 30 мин при постоянной температуре(не ниже 15^оС и не выше 30^оС). Вновь перемешав содержимое кюветы, повторно измеряют оптическую плотность (Е2). Устанавливают прирост оптической плотности Е = Е2 - Е1 и с помощью стандартов определяют количество фибронектина в образцах плазмы или сыворотки крови. Спектрофотометрируют пробы против воздуха в микрокюветах (объемом 1 мл с длиной оптического пути 10 мм) при длине волны 365 нм на спектрофотометре СФ-26.

Преимущества предлагаемого метода перед отечественными и зарубежными аналогами: высокая чувствительность (10 мкг/мл) и возможность исследования содер-жания фибронектина в малых объемах плазмы крови (20 мкл), что свидетельствуют о перспективности использования данного метода в клинико-диагностических лабора-ториях приизучении функционирования ретикулоэндотелиальной и свертывающей систем.

С внедрением метода появилась возможностьвыявления животных с понижен-ной свертываемостью крови ипроведения лечения с целью предотвращения крово-течений при травмировании.