ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результат выполнения научно-исследовательской работы.

В эксперименте были использованы поместные подсвинки (ландрас х крупная белая). Трансгенные животные поmmt1-hgrfживотные 4 и 5 покаленей были получены искусственным осеменением нетрансгенных свинок семенем трансгенных хряков №276 и №1236. Были сформированы 2 группы аналогов - опытная (трансгенные) и контрольная по 10 голов в каждой. Подопытные подсвинки были вакцинированы поливалентной вакциной против листоспироза, парвовирусной болезни, болезни Ауески и болезни Тешена. Образцы крови для лабораторных исследований отбирали из ушной вены в утренние часы (9-11 часов) по следующей схеме: 1 - до вакцинации; 2 - через 30 дней после вакцинации.

Определив специфический фактор защиты организма - титры антител к антигенам, бактерицидную активность сыворотки крови, а также морфологический состав крови можно установить уровень иммунитета животных.

Сыворотка крови подопытных животных исследовалась в НПО «Нарвак» и НИИ пушного звероводства и кролиководства им. Афанасьева, Раменский район Московской области.

Трансгенность и стрессустойчивость устанавливали методом ПЦР - ПДРФ в лаборатории молекулярной генетики и цитологии ВНИИЖа. Бактерицидную активность - фотонефелометрическим методом, титр антител - реакцией нейтрализации (РН) в культуре клеток.

Лейкограмму устанавливали после окрашивания мазков по Романовскому -Гимза и подсчётом форменных элементов крови под микроскопом при увеличении 90х методом Филлипченко.

С целью исключения влияния фактора стресса на иммунологические показатели, животных подопытных групп протестировали на наличие точковой мутации ЦХТ в позиции 1843 в гене рианодинового рецептораryr-1. После проведённого анализа было установлено, что все подсвинки являютсяnn- носителями, т. е. Стрессустойчивыми.

В таблице1 представлены результаты определения усреднённых титров специфических антител животных к 4 вирусным антигенам. Довакционные титры антител не приводятся, так как их значение было нулевым.

Таблица1

Усреднённые титры антител подопытных животных после иммунизации вакциной

Согласно анализу данных таблицы, у всех животных было отмечено наличие антител к соответствующим антигенам, входящим в вакцину. Через месяц после иммунизации усреднённые титры антител к вирусу болезни Тешена и лептоспироза у трансгенных животных были выше на 10,11% и 25% (соответственно) по сравнению с животными контрольной группы. Однако, к вирусам болезни Ауески и парвовирусу титры антител у этих подсвинков были ниже на 30% и 20,7% соответственно.

В таблице 2 представлена бактерицидная активность подопытных животных.

Таблица 2

Бактерицидная активность сыворотки крови в опытных группах до и после вакцинации

В результате обработки данных по наиболее важному показателю естественной резистентности животных было установлено, что этот показатель до вакцинации у подсвинков трансгеной группы был ниже, чем в контрольной на 4,5%, после иммунизации на 53,5%.

Картина крови трансгенных и контрольных животных представлена в виде лейкограммы.

Лейкограмма крови трансгенных и нетрансгенных подсвинков

до (1) и после (2) вакцинации

По результатам исследования мазков крови было отмечено, что картина крови отражала физиологическое состояние животных. На основании замеченных изменений можно сделать предположение, что на фоне регенеративного сдвига нейтрофилов и лимфоцитоза, эозинофилия является, в данном случае, предвестником благоприятного течения вакцинации в обоих группах.

После вакцинации в течение месяца наблюдалось снижение веса подопытных животных в обоих группах, но к концу опыта у многих подсвинков вес восстановился.

Итак введение вакцины 4-месячным подсвинкам показало, что у трансгенных животных показатели титров антител и бактерицидной активности были ниже, чем у контрольных. Однако, нет оснований утверждать, что устойчивость к вирусным болезням у таких животных низкая. Ранее проведённые исследования по установлению иммунного статуса трансгенных и контрольных животных после иммунизации вакциной ОКЗ (против сальмонелёза, клебсиелеза, колибактериоза и протейной инфекции молодняка) показали, что некоторые показатели естественной резистентности превосходят аналогичные нетрансгенных, особенно титры антител к антигенам вакцины ОКЗ. Данный опыт лишь подтверждает мнение учёных о чётких различиях в иммунных реакциях организма свиней на вирусные и бактериальные антигены, наблюдаемые с 1-1,5-месячного возраста и старше. При этом на бактериальные возбудители развивается микро- и макрофагальные реакции бласттрансформация лимфоцитов в лимфоузлах и селезёнке, с последующим образованием плазматических клеток, часть из которых синтезирует антитела против указанных антигенов. На вирусные антигены микрофагальные реакции не отмечаются, а макрофагальная реакция слабая, наиболее ярко проявляется бласттрансформация лимфоцитов. Плазмоцитарная реакция появляется позже и выражена слабее. Титры антител трансгенных животных к вирусам болезни Тешена и лептоспироза выше, чем эти значения у контрольных подсвинков.