ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Реакцию диффузной преципитации (РДП) используют в ветеринарной практике для определения антигенов возбудителя антракса в старом трупном материале, кожевенном сырье и кормах. Предлагаем использовать РДП с целью обнаружения антигенов возбудителя в почве как специфический экспресс-метод при паспортизации территорий, на которых были захоронены животные павшие от сибирской язвы.

Для постановки реакции необходимы: прецепитирующая сибиреязвенная сыворотка, стандартный сибиреязвенный антиген, нормальная сыворотка лошади, агаровый гель 0,8-1%-ной концентрации в фосфатном буферном растворе рН 7,2-7,4, изотонический раствор хлорида натрия, исследуемая проба почвы. Последняя представляет собой взвесь убитых автоклавированием микроорганизмов, выделенных из почвы на питательной среде. В качестве контрольного положительного антигена используется вакцинный возбудитель из штамма 55. РДП проводится в агаре высокого качества, который разливают в чашки Петри, охлаждают и делают лунки (рис.). После затвердения агара в центральную лунку наливают преципитирующую сыворотку, в остальные - исследуемые пробы и стандартный сибиреязвенный антиген в количестве 0,2 мл в каждую лунку. Чашку инкубируют во влажной камере при комнатной температуре в течение 7 дней и ежедневно просматривают.

Положительная РДП характеризуется появлением белых полос преципитации между исследуемой пробой и преципитирующей сывороткой при наличии полос преципитации между лунками с преципитирующей сывороткой и стандартным сибиреязвенным антигеном. Возбудитель антракса считается идентифицированным в случае плавного слияния линий преципитации между лунками с преципитирующей сывороткой и стандартным сибиреязвенным антигеном. Возбудитель антракса считается идентифицированным в случае плавного слияния линий преципитации между лунками с преципитирующей сывороткой, стандартным антигеном и исследуемой пробой. В случае перекрещивания полос преципитации возбудитель не может быть признан идентифицированным.

Экономический эффект от внедрения предложения на кафедрах эпизоотологии и организации ветеринарного дела, микробиологии, вирусологии и ветсанэкспертизы с учетом снижения стоимости исследований, сокращения затрат рабочего времени составил 375 тысяч рублей.

+ИП ПА

ПС

ПА ИП

-

Рис. Реакция диффузной преципитации в агаре. ПС - преципитирующая сыворотка, ПА - преципитирующий антиген, ИП - испытуемая проба